Cariotipo

Para el estudio de los cromosomas, a menudo se usan hemocultivos a corto plazo, así como células de la médula ósea y cultivos de fibroblastos. La sangre entregada al laboratorio con anticoagulante se somete a centrifugación para la precipitación de glóbulos rojos, y los leucocitos se incuban en el medio de cultivo durante 2-3 días. Se agrega fitohemaglutinina a la muestra de sangre, ya que acelera la aglutinación de los eritrocitos y estimula la división de los linfocitos. La fase más adecuada para el estudio de los cromosomas es la metafase de la mitosis, por lo que la colchicina se usa para detener la división de los linfocitos en esta etapa. Agregar este medicamento al cultivo conduce a un aumento en la proporción de células que están en metafase, es decir, en la etapa del ciclo celular, cuando los cromosomas se observan mejor. Cada cromosoma se replica (produce su propia copia) y después de la coloración adecuada es visible en forma de dos cromátidas unidas al centrómero o constricción central. Las células se tratan luego con una solución hipotónica de cloruro de sodio, se fija y se tiñe.

Para teñir los cromosomas, se usan con mayor frecuencia el colorante Romanovsky-Giemsa, el 2% de acetaminomina o el 2% de acetazarina. Manchan los cromosomas por completo, de manera uniforme (el método de rutina) y pueden usarse para identificar anomalías numéricas de los cromosomas humanos.

Para obtener una imagen detallada de la estructura de los cromosomas, la identificación (determinación) de los cromosomas individuales o sus segmentos, se utilizan diversos métodos de tinción diferencial. Los métodos más comúnmente utilizados son Giemsa, así como G-y Q-flexión. Un examen microscópico del fármaco a lo largo del cromosoma revela una serie de bandas teñidas (heterocromatina) y sin pintar (eucromatina). El carácter de la estriación transversal obtenida en este caso permite identificar cada cromosoma en el conjunto, ya que la alternancia de rayas y sus tamaños son estrictamente individuales y constantes para cada par.

Las placas metafásicas de las células individuales son fotografiadas. Los cromosomas individuales se cortan de las fotografías y se pegan en la hoja de papel en orden; tal imagen de cromosomas se llama cariotipo.

El uso de tinciones adicionales, así como nuevos métodos para obtener preparaciones cromosómicas, que permiten estirar los cromosomas en longitud, aumentan significativamente la precisión del diagnóstico citogenético.

Se ha desarrollado una nomenclatura especial para describir el cariotipo humano. El cariotipo normal de un hombre y una mujer se designa como 46, XY y 46, XX, respectivamente. En el síndrome de Down, que se caracteriza por la presencia de un cromosoma 21 adicional (trisomía 21), el cariotipo de las mujeres se describe como 47, XX 21+ y hombres - 47, XY, 21+. En presencia de una anomalía estructural del cromosoma, es necesario indicar un brazo largo o corto alterado: la letra p denota un brazo corto, un brazo largo y una translocación. Por lo tanto, cuando se elimina el brazo corto del cromosoma 5 (el síndrome de "grito de gato"), el cariotipo femenino se describe como 46, XX, 5p-. La madre de un niño con síndrome de Down de translocación: un portador de una translocación equilibrada de 14/21 tiene un cariotipo de 45, XX, t (14q; 21q). El cromosoma de translocación se forma cuando los brazos largos del cromosoma 14 y 21 se fusionan, se pierden los hombros cortos.

Cada hombro se divide en distritos, y a su vez, en segmentos, y esos y otros se designan con números arábigos. El centrómero del cromosoma es el punto de partida para el recuento de regiones y segmentos.

Por lo tanto, se utilizan cuatro marcadores para la topografía de los cromosomas: número de cromosomas, símbolo de hombro, número de distrito y número de segmento dentro de la región determinada. Por ejemplo, 6p21.3 registro significa que estamos hablando del sexto par de cromosomas, su brazo corto, zona 21, el segmento 3. Hay personajes más opcionales, en particular, PTER - al final del brazo corto, qter - al final del brazo largo.

El método de investigación citogenética permite detectar deleciones y otros cambios en los cromosomas solo en el tamaño de aproximadamente 1 millón de bases (nucleótidos).

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