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Southern blotting
Último revisado: 05.07.2025
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El Southern blotting (desarrollado por E. Southern y R. Davis en 1975) es el principal método utilizado actualmente para identificar genes de una enfermedad específica. Para ello, se extrae ADN de las células del paciente y se trata con una o más endonucleasas de restricción. Los fragmentos resultantes se someten a electroforesis, lo que permite separarlos por tamaño (los fragmentos más pequeños se desplazan más rápido por los poros del gel). A continuación, los fragmentos se transfieren (reimprimen) a un filtro de nitrocelulosa, sobre el cual se coloca una sonda marcada radiactivamente. La sonda se une únicamente a la secuencia complementaria. Posteriormente, mediante autorradiografía, se determina la posición del fragmento de ADN genómico deseado en el electroferograma.
La hibridación con una sonda de ADN marcada de preparaciones de ADN o ARN aplicadas gota a gota sobre una matriz sólida sin restricción previa y electroforesis se denomina hibridación de puntos o de ranuras, dependiendo de la configuración del punto de ADN en el filtro (redondo u oblongo, respectivamente).
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