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Hibridación in situ
Último revisado: 04.07.2025
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El procedimiento de hibridación puede llevarse a cabo no solo en gel, filtros o solución, sino también en preparaciones histológicas o cromosómicas. Este método se denomina hibridación in situ. Una variante del método, en la que se utilizan como sondas preparaciones de ADN o ARN marcadas con fluorocromos, se denomina FISH (hibradización in situ con fluoresceína). La sonda de ADN marcada se aplica a preparaciones de cromosomas en metafase teñidos diferencialmente y preparados para la hibridación (desnaturalizados). Se utiliza un tratamiento preliminar de los cromosomas para facilitar el acceso de la sonda al ADN genómico. Tras eliminar las moléculas de ADN no unidas y aplicar una emulsión fotosensible (cuando se utiliza un marcador radiactivo), o realizar el tratamiento adecuado (cuando se utilizan sondas de ADN marcadas con biotina o fluoresceína), los sitios de localización de las secuencias de ADN complementarias a la sonda de ADN utilizada pueden detectarse directamente mediante microscopía como puntos característicos sobre las secciones correspondientes de ciertos cromosomas.
Este método de investigación nos permite determinar no sólo la afiliación cromosómica, sino también la localización intracromosómica del gen en estudio.
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