El agente causante de la tularemia

La tularemia es una enfermedad primaria de animales (roedores); en humanos se presenta como una enfermedad infecciosa aguda con un cuadro clínico variado y una recuperación lenta. El agente causal de la tularemia, Francisella tularensis, fue descubierto por G. McCoy y S. Chapin en 1912 durante una epizootia entre ardillas terrestres en la zona del lago Tulare (California), estudiada en detalle por E. Francis, en cuyo honor se nombró el género.

Estos son bacilos polimórficos cocoides o elipsoides muy pequeños, de 0,2-0,7 µm de tamaño, que muy a menudo dan una tinción bipolar cuando se utilizan métodos de tinción especiales; son inmóviles, gramnegativos, no forman esporas; catalasa-negativos, forman H2S, aerobios estrictos, la temperatura óptima para el crecimiento es de 37 °C, pH 6,7-7,2. Las cepas virulentas tienen una cápsula, forman ácido sin gas durante la fermentación de algunos carbohidratos (glucosa, maltosa, manosa, fructosa, dextrina), el grado de fermentación varía entre cepas, el contenido de G + C en el ADN es de 33-36 mol %. F. tularensis no crece en medios ordinarios. G. McCoy y Sh. Chapin utilizaron un medio de yema coagulada. En él, el bacilo de la tularemia crece en forma de pequeñas y delicadas colonias que se asemejan a gotas de rocío; posteriormente, el cultivo adquiere la apariencia de una delicada capa de piel de tiburón con una consistencia mucosa ligeramente expresada. E. Francis propuso un agar nutritivo para el crecimiento del bacilo de la tularemia, que contiene entre un 0,05 % y un 0,1 % de cistina, un 1 % de glucosa y entre un 5 % y un 10 % de sangre. En dicho medio, el crecimiento es más exuberante y rugoso: las colonias son redondas, de superficie lisa, de color lechoso, húmedas y de consistencia mucosa, rodeadas de un halo verde característico. El crecimiento es lento; las colonias alcanzan su tamaño máximo entre el 3.º y el 5.º día (1-4 mm). Las bacterias de la tularemia se reproducen bien en el saco vitelino del embrión de pollo, causando su muerte entre el 3.º y el 4.º día.

Los siguientes aminoácidos son necesarios para el crecimiento de F. tularensis: arginina, leucina, isoleucina, lisina, metionina, prolina, treonina, histidina, valina, cistina; para algunas subespecies, serina, tirosina y ácido aspártico. Además, para su crecimiento también necesitan ácido pantoténico, tiamina e iones Mg₂. Teniendo en cuenta estas características, se pueden utilizar medios sintéticos para el cultivo de F. tularensis.

El género Francisella pertenece a la clase Gammaproteobacteria, filo Proteobacteria. Este género también incluye F. novicida, cuya patogenicidad para los humanos no se ha establecido.

El agente causal de la tularemia es un parásito intracelular. Su virulencia se debe a una cápsula que inhibe la fagocitosis; a la neuraminidasa, que promueve la adhesión; a la endotoxina; a las propiedades alergénicas de la pared celular, así como a la capacidad de reproducirse en los fagocitos y suprimir su efecto mortífero. Los mecanismos de virulencia aún no se han descifrado. Además, se han encontrado receptores capaces de interactuar con fragmentos Fc de inmunoglobulinas IgG en el bacilo de la tularemia. Como resultado de esta unión, se altera la actividad de los sistemas del complemento y de los macrófagos.

F. tularensis en su forma S (virulenta) posee dos antígenos: O y Vi (antígeno capsular). El antígeno O está emparentado con los antígenos de Brucella. La disociación S->SR->R provoca la pérdida de la cápsula, la virulencia y la inmunogenicidad. La especie F. tularensis se divide en tres razas geográficas (subespecies):

• Holártico (poco patógeno para los conejos domésticos, no fermenta el glicerol y no tiene la enzima citrulina ureidasa, que se encuentra en países del hemisferio norte);
• Asia central (poco patógena para los conejos, tiene citrulina ureidasa y fermenta el glicerol);
• Neártico (americano), más patógeno para los conejos, fermenta el glicerol, tiene citrulina ureidasa.

Además, las cepas de las subespecies americana y de Asia central tienen actividad fosfatasa, que está ausente en las cepas de la subespecie holártica.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ]

Resistencia del agente causal de la tularemia

F. tularensis es bastante estable en el ambiente externo, especialmente si se encuentra en material patológico. En forrajes y granos contaminados con excrementos de roedores enfermos, sobrevive hasta 4 meses; en agua, hasta 3 meses; en hielo, más de 1 mes. Es sensible a la luz solar directa (muere en 30 minutos) y a las altas temperaturas (a 60 °C, muere en 10 minutos). Bajo la influencia de una solución de lisol al 3%, alcohol al 50%, formalina y otros antisépticos, muere en 5-10 minutos.

Epidemiología de la tularemia

El principal reservorio de la tularemia en la naturaleza son los roedores, entre los cuales se observan epizootias en condiciones naturales. Los humanos se infectan únicamente a través de animales; el patógeno no se transmite de persona a persona. El patógeno se ha encontrado en 82 especies de roedores y lagomorfos, y se encuentra con mayor frecuencia en representantes de cuatro familias: roedores similares a ratones (Múridos), liebres (Lepóridos), ardillas (Sciúridos) y jerbos (Dipódidos). En Rusia, los principales portadores son roedores similares a ratones: ratas de agua, topillos comunes, ratones domésticos y ratas almizcleras.

Según su sensibilidad a la tularemia, los animales se pueden dividir en cuatro grupos:

• Grupo 1: los más susceptibles (topillos, ratas de agua, ratones domésticos, ratones blancos, cobayas y algunos otros). La dosis letal mínima es de una célula microbiana.
• Segundo grupo: menos sensibles (ratas grises, tuzas, etc.). La dosis letal mínima es de mil millones de células microbianas; sin embargo, una sola célula microbiana es suficiente para infectar a algunas de ellas.
• 3.er grupo (depredadores: gatos, zorros, hurones). Resistente a altas dosis infecciosas, la enfermedad cursa sin manifestaciones visibles.
• Grupo 4 – inmunes a la tularemia (ungulados, animales de sangre fría, aves).

Para los humanos, la dosis mínima infecciosa es una célula microbiana. Los humanos pueden infectarse de todas las maneras posibles: contacto directo e indirecto con roedores enfermos, sus cadáveres u objetos infectados con roedores; alimentaria (al consumir alimentos y agua infectados con roedores), polvo en el aire y transmisión. La infección con bacterias de la tularemia se ha establecido en 77 especies de artrópodos hematófagos. De particular importancia son las garrapatas ixódidas, en las que el patógeno persiste durante toda la vida e incluso se transmite transováricamente a la descendencia. Estas circunstancias contribuyen al establecimiento de la enfermedad en la naturaleza. Los humanos se infectan con garrapatas no por picaduras, sino como resultado del contacto del patógeno con la piel junto con los excrementos de la garrapata.

En Rusia hay siete tipos principales de paisajes de focos naturales de tularemia: pantanos, praderas, estepas, bosques, arroyos de montaña, tundra y tugai (desierto).

[ 7 ], [ 8 ], [ 9 ], [ 10 ]

Síntomas de la tularemia

El agente causal de la tularemia penetra en el cuerpo a través de las membranas externas (piel y mucosas, dañadas e intactas). Con frecuencia se forman úlceras en el punto de penetración. A través de los vasos linfáticos, las bacterias penetran en el ganglio linfático regional y se multiplican libremente en él; el proceso inflamatorio conduce a la formación de un bubón. Desde aquí, el patógeno penetra en la sangre, la bacteriemia provoca la generalización del proceso, afectando a diversos órganos y tejidos, y la proliferación bacteriana conduce a la formación de granulomas y úlceras necróticas. La reestructuración alérgica del cuerpo se asocia con la bacteriemia y la generalización. El período de incubación de la tularemia varía de 2 a 8 días. La enfermedad comienza de forma aguda: aparecen fiebre, cefalea, dolor muscular e hiperemia facial. La evolución posterior depende del punto de entrada, según el cual se distinguen las siguientes formas clínicas de tularemia: ulcerativo-glandular (bubónica), oculoglandular, anginoso-glandular, abdominal y pulmonar. La mortalidad en la tularemia no supera el 1-2%.

La inmunidad postinfecciosa es fuerte, persistente y, en la mayoría de los casos, de por vida. Es de naturaleza celular y está causada principalmente por linfocitos T y macrófagos, y en menor medida por anticuerpos. La fagocitosis en personas con inmunidad es completa.

Diagnóstico de laboratorio de la tularemia

Para diagnosticar la tularemia se utilizan todos los métodos microbiológicos. El estudio se realiza en laboratorios de alta seguridad. El material de estudio (sangre, punción de bubón, raspado de úlcera, secreción conjuntival, placa faríngea, esputo, etc.) se determina según la forma clínica de la enfermedad. Además, se puede tomar agua y alimentos para el estudio. En focos naturales de tularemia, se realizan estudios sistemáticos planificados para aislar el agente causal en roedores.

El método bacteriológico para diagnosticar la tularemia en humanos rara vez da resultados positivos. Generalmente, se aísla un cultivo puro tras acumularlo en animales de laboratorio susceptibles. Se utilizan ratones blancos y cobayas para bioensayos. Los ratones se infectan por vía subcutánea, los cobayas por vía intraperitoneal; los animales mueren entre el tercer y el sexto día, a veces después de la escarcha. Los animales infectados se mantienen en condiciones especiales (como en el diagnóstico de la peste) y se observan durante 6 a 14 días. Los animales de experimentación no mueren durante 7 a 15 días; se sacrifican entre el decimoquinto y el veinte y se realiza la autopsia de los cadáveres. En presencia de tularemia, se detectan cambios patológicos y anatómicos en forma de un proceso productivo con necrosis. Se aísla un cultivo puro de órganos internos en un medio vitelino, un concentrado sanguíneo de glucosa-cisteína, etc. La identificación se basa en la morfología y las propiedades tintóreas del patógeno, la ausencia de crecimiento en MPA y la aglutinación con suero homólogo. Patogenicidad para ratones blancos y cobayas. Se puede aislar un cultivo puro infectando embriones de pollo de 12 días y el saco vitelino. Para aislar un cultivo puro del patógeno del agua, se centrifuga o se filtra a través de filtros bacterianos y el sedimento se utiliza para infectar animales de laboratorio. Al estudiar productos alimenticios, estos se lavan con MP B, se centrifugan y el sedimento se utiliza para infectar animales de laboratorio.

Simultáneamente al examen bacteriológico, se preparan frotis del material en estudio y se tiñen según Romanovsky-Giemsa. En los frotis de órganos se pueden detectar pequeñas bacterias cocoides y bacilos, que se localizan intracelularmente y en grupos, formando una delicada cápsula.

Para el diagnóstico se utilizan una reacción de aglutinación detallada, RPGA y RIF.

Las pruebas alérgicas se utilizan para el diagnóstico precoz de la tularemia (a partir del quinto día tras el inicio de la enfermedad). Se utilizan dos tipos de tularina y, por consiguiente, dos métodos de administración: cutánea e intradérmica. Dado que la concentración del alérgeno en ambos tipos de tularina es diferente, no se acepta el uso de tularina cutánea para una prueba intradérmica ni viceversa. Los resultados de la reacción alérgica se contabilizan dinámicamente tras 24, 36 y 48 horas. Un infiltrado con un diámetro de al menos 5 mm se considera positivo. En personas vacunadas o que han padecido tularemia, las pruebas alérgicas se mantienen positivas durante varios años (reacción anamnésica).

Prevención específica de la tularemia

Para la prevención específica, se utiliza una vacuna contra la tularemia, obtenida en 1930 por los médicos militares rusos B. Ya. Elbert y N. A. Gaisky a partir de la cepa Me 15. La vacuna proporciona una inmunidad sólida durante 5-6 años en caso de infección con las subespecies europea y holártica, y es eficaz contra la variante americana del patógeno. La vacunación se realiza según las indicaciones epidemiológicas, así como para personas pertenecientes a grupos de riesgo. Se permite la vacunación simultánea contra la tularemia y la brucelosis, la tularemia y la peste, así como contra la tularemia y algunas otras infecciones.

La prevención no específica de la tularemia es la misma que la de otras zoonosis y está dirigida principalmente al control de roedores.