Análisis bacterioscópico del esputo

La identificación oportuna del agente infeccioso es fundamental para la correcta elección del fármaco antibacteriano y así prevenir el desarrollo de resistencia bacteriana cuando se prescribe un antibiótico empíricamente. La tinción de Gram es el método más común para teñir todo tipo de material obtenido del paciente (esputo, lavado broncoalveolar, etc.) y así identificar de forma rápida y aproximada el agente infeccioso.

Una evaluación preliminar de un posible agente etiológico se realiza mediante bacterioscopia de un frotis de esputo teñido con Gram. Un frotis de esputo teñido con Gram se examina antes de inocularlo en medios nutritivos también para evaluar su idoneidad para el cultivo e identificar el probable patógeno. El esputo se considera apto si se encuentran más de 25 leucocitos y menos de 10 células epiteliales en el frotis teñido con Gram a bajo aumento bajo un microscopio. Los signos de una muestra de esputo de alta calidad que se puede utilizar para el cultivo incluyen un predominio de leucocitos sobre células epiteliales, así como la presencia de bacterias de una especie que se encuentran dentro o alrededor de los leucocitos. Las bacterias grampositivas en la preparación son azul oscuro y las gramnegativas son rosas. Los agentes causantes de la neumonía atípica (micoplasma, legionella, rickettsia y clamidia) no se tiñen con Gram, por lo que se utilizan principalmente métodos serológicos para detectarlos.

La tinción de frotis de esputo según Ziehl-Neelsen se utiliza para identificar bacilos acidorresistentes, principalmente micobacterias de la tuberculosis. La preparación se prepara a partir de partículas purulentas de esputo, seleccionadas de 4 a 6 lugares diferentes. Las partículas seleccionadas se muelen cuidadosamente entre dos portaobjetos de vidrio hasta obtener una masa homogénea, se secan al aire y se fijan a la llama de un mechero. Las micobacterias de la tuberculosis se tiñen de rojo, mientras que el resto de los elementos del esputo y las bacterias se tiñen de azul. Las micobacterias de la tuberculosis se presentan como bacilos delgados, ligeramente curvados, de longitud variable, con engrosamientos en los extremos o en el centro, ubicados en grupos e individualmente. La detección de micobacterias de la tuberculosis es el signo más fiable de la enfermedad pulmonar tuberculosa. El método de tinción de frotis de Ziehl-Neelsen para las formas activas de tuberculosis pulmonar tiene una sensibilidad del 50 % y una especificidad del 80 % al 85 %.

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