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Reacción en cadena de la polimerasa (PCR) en el diagnóstico de enfermedades infecciosas
Último revisado: 05.07.2025
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La PCR es uno de los métodos de diagnóstico de ADN que permite multiplicar por millones el número de copias de la sección detectada del genoma (ADN) de bacterias o virus mediante la enzima ADN polimerasa. La sección analizada de ácido nucleico específica de un genoma dado se multiplica (amplifica) muchas veces, lo que permite su identificación. Primero, la molécula de ADN de bacterias o virus se divide en dos cadenas mediante calor; luego, en presencia de cebadores de ADN sintetizados (la secuencia de nucleótidos es específica del genoma que se está determinando), estos se unen a secciones complementarias de ADN, y la segunda cadena de ácido nucleico se sintetiza después de cada cebador en presencia de ADN polimerasa termoestable. Se obtienen dos moléculas de ADN. El proceso se repite muchas veces. Una molécula de ADN, es decir, una partícula de bacteria o virus, es suficiente para el diagnóstico. La introducción de una etapa adicional en la reacción (la síntesis de ADN en una molécula de ARN mediante la enzima transcriptasa inversa) hizo posible analizar virus de ARN, como el virus VHC. La PCR es un proceso de tres etapas que se repite cíclicamente: desnaturalización, hibridación de cebadores y síntesis de ADN (polimerización). La cantidad de ADN sintetizada se identifica mediante ELISA o electroforesis.
La PCR puede utilizar diversos materiales biológicos: suero sanguíneo o plasma, raspado uretral, biopsia, líquido pleural, líquido cefalorraquídeo, etc. La PCR se utiliza principalmente para diagnosticar enfermedades infecciosas como la hepatitis viral B, la hepatitis viral C, la hepatitis viral D, la infección por CMV, las infecciones de transmisión sexual (gonorrea, clamidia, micoplasma, infecciones por ureaplasma), tuberculosis, infección por VIH, etc.
La ventaja de la PCR en el diagnóstico de enfermedades infecciosas frente a otros métodos de investigación es la siguiente:
- el agente infeccioso puede detectarse en cualquier entorno biológico del cuerpo, incluido el material obtenido durante una biopsia;
- Es posible diagnosticar enfermedades infecciosas en las primeras etapas de la enfermedad;
- es posible evaluar cuantitativamente los resultados de la investigación (cuántos virus o bacterias hay en el material estudiado);
- alta sensibilidad del método; por ejemplo, la sensibilidad de la PCR para la detección del ADN del virus de la hepatitis B en la sangre es de 0,001 pg/ml (aproximadamente 4×102 copias /ml), mientras que la sensibilidad del método de hibridación de ADN utilizando sondas ramificadas es de 2,1 pg/ml (aproximadamente 7×105 copias /ml).
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