Reacción en cadena de la polimerasa (PCR) en el diagnóstico de enfermedades infecciosas

PCR - uno de los métodos para el diagnóstico de ADN que permite aumentar el número de copias de una porción detectable del genoma (ADN) de bacterias o virus es un millón de veces usando una enzima ADN polimerasa. Una prueba para este segmento de ácido nucleico genómico específico multiplicado repetidamente (amplificado) que permite su identificación. En primer lugar, una molécula de ADN de bacterias o virus por calentamiento divide en dos cadenas, a continuación, en presencia de los cebadores de ADN sintetizados (secuencia de nucleótidos específicos para la genómica definida) ellos es vinculante con tramos complementarios de ADN, sintetizado la segunda hebra del ácido nucleico después de cada cebador en presencia de una ADN polimerasa termoestable . Se obtienen dos moléculas de ADN El proceso se repite muchas veces. Para el diagnóstico, una molécula de ADN, es decir, una bacteria o una partícula viral, es suficiente. Reacción de un paso adicional - la síntesis de ADN en la molécula de ARN utilizando la enzima transcriptasa inversa - ha permitido poner a prueba los virus de ARN tales como el virus de HCV. PCR - proceso de tres etapas, ciclos repetidos de desnaturalización, hibridación de los cebadores, la síntesis de DNA (polimerización). La cantidad sintetizada de ADN se identifica por ELISA o por electroforesis.

PCR se puede utilizar en diferente material biológico - suero o plasma sanguíneo, el raspado de la uretra, la biopsia, líquido pleural, líquido cefalorraquídeo, etc. La primera PCR se usó para el diagnóstico de enfermedades infecciosas como el virus de la hepatitis B, virus de la hepatitis C, virus de la hepatitis D, la infección por CMV, infección infecciosa de transmisión sexual (gonorrea, diynaya basura, micoplasma, la infección por Ureaplasma), tuberculosis, VIH -infección, etc.

La ventaja de la PCR en el diagnóstico de enfermedades infecciosas sobre otros métodos de investigación es la siguiente:

• el agente causal de la infección se puede encontrar en cualquier entorno biológico del cuerpo, incluido el material obtenido mediante biopsia;
• Es posible diagnosticar enfermedades infecciosas en las primeras etapas de la enfermedad;
• Es posible realizar una evaluación cuantitativa de los resultados de la investigación (cuántos virus o bacterias están contenidos en el material bajo investigación);
• alta sensibilidad del método; por ejemplo, sensibilidad de la PCR para la detección de ADN del virus de la hepatitis B en la sangre es 0,001 pg / ml (aproximadamente 4 × 10 ² copias / ml), mientras que la sensibilidad de un método de hibridación de ADN usando sondas ramificados - 2,1 pg / ml (aproximadamente 7 × 10 ⁵ copias / ml).

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