Métodos inmunológicos de diagnóstico de enfermedades hereditarias

Recientemente, el complejo principal de histocompatibilidad, el HLA (Antígenos Leucocitarios Humanos), se ha considerado un importante marcador inmunológico en la genética de poblaciones. Los antígenos de este sistema se determinan inmunológicamente en los leucocitos sanguíneos. El complejo génico HLA se localiza de forma compacta en el brazo corto del cromosoma 6 (6p21.3). La localización de este sistema y la extensión de sus loci en el cromosoma permitieron calcular que el complejo constituye aproximadamente 1/1000 del acervo genético del organismo. Los antígenos de histocompatibilidad participan en la regulación de la respuesta inmunitaria del organismo y en el mantenimiento de la homeostasis inmunitaria. Debido a su polimorfismo y a su localización compacta, los antígenos HLA han adquirido gran importancia como marcador genético.

Actualmente, se han descubierto más de 200 alelos de este sistema; es el más polimórfico y biológicamente significativo de los sistemas genéticos del cuerpo humano. Los trastornos de diversas funciones del complejo mayor de histocompatibilidad contribuyen al desarrollo de diversas enfermedades, principalmente autoinmunes, oncológicas e infecciosas.

Según la ubicación del complejo HLA en el cromosoma 6, se distinguen los siguientes loci: D/DR, B, C, A. Los nuevos loci G, E, H, F se han descubierto relativamente recientemente; su papel biológico se está estudiando activamente en la actualidad. Se distinguen tres clases de antígenos en el complejo principal de histocompatibilidad. Los antígenos de clase I están codificados por los loci A, B, C. Los nuevos loci también pertenecen a esta clase. Los antígenos de clase II están codificados por los loci DR, DP, DQ, DN, DO. Los genes de las clases I y II codifican antígenos de trasplante. Los genes de la clase III codifican componentes del complemento (C2, C4a, C4b, Bf), así como la síntesis de isoformas de varias enzimas (fosfoglucomutasa, glicoxilasa, pepsinógeno-5, 21-hidroxilasa).

La presencia de Ag asociada a una determinada enfermedad en una persona permite suponer una mayor predisposición a esta patología y, en algunas correlaciones, por el contrario, resistencia a ella.

La determinación de los antígenos del sistema HLA se realiza en linfocitos aislados de sangre periférica utilizando sueros de histotipado en una reacción microlinfocitotóxica o métodos genéticos moleculares.

Establecer vínculos asociativos entre las enfermedades y el antígeno del complejo mayor de histocompatibilidad permite:

• identificar grupos con mayor riesgo de desarrollar la enfermedad;
• determinar su polimorfismo, es decir, identificar grupos de pacientes con características del curso o patogénesis de la enfermedad; en este sentido, se puede realizar un análisis de la sintropía de las enfermedades, identificando los prerrequisitos genéticos para la combinación de varias formas de patología; la asociación con antígenos que determinan la resistencia a las enfermedades permite identificar a individuos con un riesgo reducido de desarrollar esta patología;
• realizar diagnósticos diferenciales de enfermedades;
• determinar el pronóstico;
• Desarrollar tácticas de tratamiento óptimas.

Dado que la mayoría de las enfermedades no tienen una conexión directa con los antígenos del complejo mayor de histocompatibilidad, se propuso la teoría de los "dos genes" para explicar la asociación entre enfermedades y antígenos HLA. Según esta teoría, existe un gen (o genes) de respuesta inmunitaria (gen Ir) estrechamente asociado con los antígenos HLA y los genes que regulan la respuesta inmunitaria. Los genes protectores determinan la resistencia a las enfermedades, y los genes provocadores determinan la sensibilidad a ciertas enfermedades.

El riesgo relativo de la enfermedad para los individuos con el genotipo correspondiente se calcula utilizando la fórmula: x = [h _p × (1 - h _c )] / [h _c × (1 - h _p )], donde h _p es la frecuencia del rasgo en los pacientes y h _c es la frecuencia en los individuos del grupo de control.

El riesgo relativo muestra la magnitud de la asociación de la enfermedad con un determinado Ag/Ag del sistema HLA (da una idea de cuántas veces mayor es el riesgo de desarrollar la enfermedad en presencia de Ag en comparación con su ausencia). Cuanto mayor sea este indicador en un paciente, mayor será la asociación con la enfermedad.

Asociación de enfermedades humanas con HLA-Ag (frecuencia genética, %)

Enfermedades	HLA	Grupo de control,%	Enfermo,%	Riesgo relativo
Reumatología
Espondiloartritis anquilosante	B27	5-7	90-93	90-150
Síndrome de Reiter	B27	6-9	69-76	32-49.6
Artritis causada por infecciones:
- Yersinia	B27		58-76	17.59
- Salmonella	B27		60-69	17.57
Artritis psoriásica	B13		9-37	4.79
Artritis reumatoide	Dw4	12-19	48-72	3.9-12.0
	DR4	20-32	70	4.9-9.33
Síndrome de Behçet	B5	13	48-86	7.4-16.4
SKV	B5		11-34	1.83
	B8		19-48	2.11
	Bw15	6-10	21-40	5.1
	DR2	26.4	57.1	3.80
	DR3	22.2	46.4	2.90
Síndrome de Gougerot-Sjögren	B8		38-58	3.15
	Dw3	26	69-87	19.0
Cardiología
Enfermedad coronaria	B7	27.8	45.8	2.19
	B14	7.5	14.8	2.14
	B15	11.1	20.4	2.05
	Cw4	18.7	32.8	2.12
Hipertensión	B18	10.4	22.6	2.52
	Otoño/Invierno 2019	12.6	28.3	2.74
Endocrinología
Diabetes tipo 1	B8	32	52-55	2.1-2.5
	B18		5-59	1.65
	B15	12	18-36	1.89-3.9
	Dw3	26	48-50	2.9-3.8
	Dw4	19	42-49	3.5-3.9
	DR3 DR3/DR4	20	60	6.10 33
Hipertiroidismo	B8	21	35-49	2.34-3.5
	D3	26	61	4.4
	DR3	20	51	4.16
Tiroiditis subaguda (de De Quervain)	Bw35	13	63-73	16.81
	Dw1		33	2.1
Enfermedad de Addison	B8		20-80	3.88-6.4
	Dw3	26	70-76	8.8-10.5
Síndrome de Itsenko-Cushing	A1		49	2.45
Gastroenterología
Anemia perniciosa	B7	19	26-52	1.7-3.1
	DR5	6	25	5.20
Gastritis atrófica	B7		37	2.55
Úlcera péptica del duodeno	A2	48.1	61.3	1.7
	A10	20.6	63.3	6.65
	B14	4.0	10.3	2.76
	B15	6.6	24.4	4.56
	B40	9.72	23.3	2.82
Hepatitis autoinmune	B8	16	37-68	2.8-4.1
	DR4	24	71	7.75
Portadores de HBsAg	Bw41		12	11.16
	B15		10-19	0,29

Enfermedades	HLA	Grupo de control,%	Enfermo,%	Riesgo relativo
Dermatología
Soriasis	Bw17	6-8	22-36	3.8-6.4
	B13	3-5	15-27	4.2-5.3
	Bw16	5	15	2.9
Dermatitis herpetiforme	B8	27-29	62-63	4.00-4.6
	DR3	19	80	16.60
Esclerodermia	B7	24	35	1.7
Pénfigo	A10			3.1
Dermatitis atópica	B13	6.86	21.28	3.67
	B27	9.94	25.53	3.11
	A10/B13	0.88	8.51	10.48
Eczema	A10	19.64	36.67	2.37
	B27	9.94	26.67	3.29
Urticaria y edema de Quincke	B13	6.86	21,21	3.65
	B5.8	1.42	12,12	9.57
	B5.35	0,71	6.06	9.02
Neurología
Esclerosis múltiple	A3	25	36-37	2.7-2.8
	B7	25-33	36-42	1.4-2.0
	Dw2	16-26	60-70	4.3-12.2
	DR2	35	51.2	1,95
	DR3	20	32.5	1.93
Miastenia	B8	21-24	52-57	3.4-5.0
	A1	20-25	23-56	3.8
	DR3	26	50	2.5
Neumología
Asma bronquial (en pacientes de 19 a 30 años)	B21	4.62	12.5	2,95
	B22	9.94	19.64	2.22
	B27	12.31	37.5	4.27
	B35	0.11	5.36	51.4
	B27/35	0.47	7.14	16.2
Otras enfermedades
Rinitis vasomotora	A3	26,98	52.38	2.98
	B17	7.57	28.57	4.88
	A3/10	2.72	23.83	11.18
	B7/17	0.47	9.52	22.28

Los datos presentados en la tabla muestran que los vínculos asociativos más fuertes se encuentran para las enfermedades con un tipo de herencia poligénica o multifactorial.

Así, la determinación de antígenos del complejo mayor de histocompatibilidad en células sanguíneas (leucocitos) permite identificar el grado de predisposición individual de una persona a una enfermedad específica y, en algunos casos, utilizar los resultados de la investigación para el diagnóstico diferencial, la evaluación del pronóstico y la selección de estrategias de tratamiento. Por ejemplo, la detección de antígenos HLA-B27 se utiliza en el diagnóstico diferencial de enfermedades autoinmunes. Se detecta en el 90-93% de los pacientes de raza caucásica con espondilitis anquilosante y síndrome de Reiter. En representantes sanos de esta raza, los antígenos HLA-B27 se detectan solo en el 5-7% de los casos. Los antígenos HLA-B27 se detectan a menudo en la artritis psoriásica, enfermedades inflamatorias intestinales crónicas que cursan con sacroileítis y espondilitis, uveítis y artritis reactiva.

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