Examen microbiológico del esputo

El examen microbiológico es el eslabón más importante en la búsqueda diagnóstica y la verificación del agente causal de la neumonía. Implica no solo aislar el agente causal, sino también estudiar sus propiedades, incluyendo la sensibilidad a diversos medicamentos con acción bactericida y bacteriostática.

Para ello, se utiliza el método de siembra de esputo en diversos medios nutritivos. En una muestra de esputo entregada al laboratorio, se seleccionan las grumos purulentos y se lavan cuidadosamente en una placa de Petri con una solución isotópica de cloruro de sodio, lo que permite, hasta cierto punto, liberarlos de la microflora del tracto respiratorio superior. La siembra de grumos purulentos de esputo se realiza en diversos medios nutritivos, cuya composición se describe en manuales especializados de microbiología. Los medios con los semilleros se incuban a 37,5 °C durante 24 horas. Se aíslan cultivos puros de las colonias cultivadas, se identifican mediante métodos microbiológicos conocidos y se determina su sensibilidad a los antibióticos.

Para determinar el contenido cuantitativo de microorganismos, se homogeneiza el esputo, se mezcla con caldo nutritivo y se preparan diluciones décuples sucesivas a partir de la mezcla, que se inoculan en placas de Petri con agar sangre. Tras 24 horas de incubación a 37,5 °C, se tienen en cuenta los resultados, contando colonias del mismo tipo en apariencia y considerando el grado de dilución del material. Se preparan frotis de las colonias y se examinan al microscopio.

Interpretación de los resultados

La interpretación de los resultados del examen microbiológico del esputo es bastante compleja, lo cual se explica por diversos factores. Ya se ha mencionado la constante proliferación del contenido bronquial con la microflora del tracto respiratorio superior y la cavidad oral, así como la frecuente presencia en el contenido traqueobronquial normal de personas sanas de la mayoría de los patógenos más comunes de enfermedades respiratorias (neumococos, estreptococos, estafilococos, etc.). En este sentido, el aislamiento en el esputo durante los estudios microbiológicos de una asociación de diversos microorganismos, la mayoría de los cuales en este caso particular son oportunistas, dificulta enormemente establecer el patógeno. Por lo tanto, para interpretar los resultados del examen microbiológico del esputo, es necesario tener en cuenta el predominio cuantitativo de un tipo particular de bacteria ( más de ^10⁻⁶... Es muy importante tener en cuenta el cuadro clínico de la enfermedad.

Los principales y posibles agentes causales de diversas formas clínicas de neumonía.

Forma clínica de neumonía	Principales patógenos	Posibles patógenos
Croupous	Neumococos	Estreptococos, Klebsiella
Post-influenza	Estafilococos, neumococos, klebsiella	Haemophilus influenzae, estreptococos
Absceso	Estafilococos, bacteroides, flora mixta	Klebsiella, Pseudomonas aeruginosa
Aspiración	Bacteroides, estreptococos anaeróbicos	Estafilococos, neumococos
Postoperatorio	Estafilococos	Neumococos, Klebsiella
Intersticial	Micoplasmas	Patógenos de la ornitosis y la psitacosis
Neumonía secundaria en pacientes hospitalizados sin tratamiento antibacteriano previo	Estafilococos, neumococos, klebsiella, bacteroides	Escherichia coli, serratia, etc.
Neumonía secundaria desarrollada en el contexto de una terapia antibacteriana.	Microorganismos patógenos facultativos	Pseudomonas, Serratia, Klebsiella, Staphylococcus, Proteus, etc.
En pacientes con bronquitis crónica	Neumococos, Haemophilus influenzae	Estafilococos, estreptococos
En pacientes con alcoholismo	Neumococos, Haemophilus influenzae, Klebsiella	E. coli, protozoos
En el síndrome de inmunodeficiencia adquirida	Pneumocystis, hongos	Citomegalovirus
En pacientes cuya atención es proporcionada por personas externas	Neumococos, estafilococos, papila hemofílica	Klebsiella, Escherichia coli

Al evaluar cuantitativamente los resultados del estudio de contaminación microbiana en pacientes con neumonía, es necesario recordar la altísima sensibilidad de este indicador a la prescripción de antibióticos. Incluso un tratamiento a corto plazo con antibacterianos puede provocar una disminución drástica de la contaminación microbiana, lo que impide una evaluación adecuada de los resultados del estudio de esputo. Por lo tanto, es recomendable recolectar esputo antes de prescribir el tratamiento antibiótico.

Cabe destacar que se utilizan medios nutritivos selectivos especiales para el cultivo de patógenos intracelulares de neumonía (micoplasma, legionella, clamidia, rickettsia). Las pruebas microbiológicas de rutina con medios nutritivos convencionales (agar-agar) nunca arrojan resultados positivos. Por lo tanto, la elección de los métodos específicos de análisis microbiológico debe realizarse con la participación del médico tratante, quien está obligado a informar al médico de laboratorio sobre sus sospechas sobre la posible participación de patógenos intracelulares en la aparición de neumonía en este paciente.

Cabe añadir que, en la práctica clínica real, incluso un examen microbiológico del esputo técnicamente perfecto permite identificar el patógeno en tan solo el 40-60 % de los casos. Por lo tanto, se pueden utilizar otros métodos de investigación modernos para verificar el patógeno. La información de un estudio bacteriológico puede incrementarse significativamente utilizando como material biológico de estudio el aspirado traqueobronquial, el líquido obtenido durante el lavado broncoalveolar (LBA), la broncoscopia, etc., en lugar del esputo.

Además, la inmunofluorescencia de diversos materiales biológicos (material de broncoscopia, sangre, contenido pleural, etc.), los métodos de diagnóstico por PCR y el estudio de la concentración de anticuerpos específicos en el suero sanguíneo permiten identificar patógenos de neumonía. Lamentablemente, estos métodos de diagnóstico aún no tienen una amplia aplicación clínica y actualmente solo se emplean en grandes centros y laboratorios especializados.

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