virus de la hepatitis B

La hepatitis B es una enfermedad infecciosa de una persona caracterizada por un daño selectivo del hígado por un virus. Esta forma de hepatitis es la más peligrosa en sus consecuencias entre todas las formas conocidas de hepatitis viral. Su agente causal es el virus de la hepatitis B (VHB).

Primer antígeno del virus de la hepatitis B se ha detectado B. Blumberg en 1964 en aborígenes australianos suero, y el patógeno se encontró en 1970, D. Dane (et al.), Y recibió el nombre de partículas de Dane, porque no había ninguna certeza de que , que esto es realmente un virus, no sus componentes. Posteriormente, todas las dudas desaparecieron, ya que en las partículas de Dane, se encontraron ADN genómico y una ADN polimerasa dependiente del ADN viral. El virión contiene tres antígenos principales, para los cuales se introdujeron las siguientes designaciones en 1974:

• HBsAg es un antígeno superficial, soluble o australiano.
• HBcAg es un antígeno nuclear (co-antígeno).
• HBeAg - antígeno e, se localiza en el núcleo del virión y, a diferencia de HBcAg, no sólo está presente en el virión, pero también circula en la sangre en una forma libre o como un complejo con el anti-HBeAg. Se secreta a la sangre desde los hepatocitos con replicación activa de HBV.

El antígeno de superficie - HBsAg - existe en forma de tres variantes morfológicamente diferentes: 1) representa la supercápside del virión completo; 2) en grandes cantidades se produce en forma de partículas con un diámetro de 20 nm, que tiene una forma esférica; 3) en forma de filamentos con una longitud de 230 nm. Químicamente son idénticos. La composición tiene un antígeno total de HBsAg y dos pares de determinantes específicos de tipo mutuamente excluyentes: d / y y w / r, por lo que hay cuatro principales subtipo HBsAg (y por lo tanto HBV): adw, adr, ayw y aur. Antigen a proporciona la formación de una inmunidad cruzada común a todos los subtipos del virus.

En realidad, el virión, la partícula Dain, tiene una forma esférica y un diámetro de 42 nm. La supercapsid del virion consiste en tres proteínas: la principal (principal), grande y mediana. El genoma está encerrado en una cápside y está representado por un ADN anular bicatenario con una masa de 1,6 MD. El ADN consiste en aproximadamente 3200 nucleótidos, pero su "más" es 20-50% más corto que el signo menos. Con el extremo 5 'del filamento largo, la proteína específica del virus se une covalentemente. Los extremos 5 'de ambas cadenas son complementarias y forman secuencias "adhesivas" de 300 nucleótidos de longitud, de modo que los filamentos se cierran en el anillo. El contenido de G + C en el ADN del virión es 48-49% en moles. En el núcleo del virión, además de DNA-DNA-DNA-DNA DNA dependiente genómico. El ADN "débil" del VHB contiene solo cuatro genes (S, C, P y X), pero están organizados de forma muy compacta. Los genes S, C, P, X se superponen fuertemente y controlan la síntesis de los siguientes productos. El gen S codifica la síntesis de la proteína principal de la cubierta y contiene toda la información sobre el antígeno de superficie del HBsAg. Además, codifica la síntesis de proteínas envolventes medianas y grandes. Las proteínas contienen un extremo COOH-terminal común, pero su traducción comienza con tres codones iniciadores diferentes. Códigos del gen C para la síntesis de proteínas de la cápside (HBcAg y HBeAg); aunque estas proteínas están codificadas por un único gen, las formas de su traducción son diferentes. Gene P es el más grande. Incluye parte de los otros tres genes y codifica las enzimas necesarias para la replicación del virus. En particular, codifica la transcriptasa inversa, el dominio de la enzima RNA-ase H, la proteína 5'-terminal de la cadena "negativa". Los códigos de genes Gene X para las proteínas que regulan la expresión (expresión) de todos los genes virales, en particular una proteína con una masa de 17 kD, que es un transactivador de transcripción de genes.

Las proteínas que forman un antígeno de superficie existen en forma glicosilada (gp) y no glicosilada. Glicosilados son gp27, gp33, gp36 y gp42 (los números se denotan por m en kD). Supercapsid HBV consiste en la proteína S principal o básica (92%); proteína M promedio (4%) y proteína L grande o larga (1%).

• La proteína principal, p24 / gp27, o la proteína principal (proteína S), es el componente principal de la envoltura del VHB. En ausencia de otras proteínas de cubierta, polimeriza y forma partículas esféricas con un diámetro de 20 nm, que consisten en 100 moléculas de polipéptido.
• Una gran proteína, p39 / gp42, o una proteína larga (proteína L), está presente en las tres formas de HBsAg. Desempeña un papel importante en la morfogénesis de los viriones y en su salida de la célula. La proteína L contiene una secuencia de proteína M que se complementa en el extremo N mediante secuencias de 108 (ayw) o 119 (adw, adr, ayr) de residuos de aminoácidos codificados por la región npe-Sl del gen S.
• La proteína media - gp33 / gp36, o la proteína M, también está presente en las tres formas morfológicas de HBsAg. La proteína M contiene, en el extremo N-terminal, una región de 55 residuos de aminoácidos codificada por la región pre-52 del gen S. Se supone que este sitio juega un papel importante en el reconocimiento del virus de la hepatitis B por las células hepáticas de un rango de huéspedes limitado (humano, mono chimpancé). Las secuencias proteicas codificadas por las regiones S-gen npe-S tienen alta inmunogenicidad, y sus determinantes están localizados en la superficie del virión. Por lo tanto, los anticuerpos contra estos antígenos juegan un papel importante en la formación de inmunidad contra la hepatitis B.

La síntesis de proteínas virales está estrechamente controlada a nivel de transcripción y traducción. En la transcripción del genoma viral, se sintetizan dos tipos de ARNm:

• un más pequeño - 2100 nucleótidos - codifica las proteínas principales y medias de la membrana;
• grande: 3.500 nucleótidos, es decir, más largo que el ADN genómico en sí mismo; contiene repeticiones terminales de 100 nucleótidos de longitud.

Este tipo de ARNm codifica la proteína de la cápside y los productos del gen P. También es una plantilla para la replicación del ADN viral. Como parte del genoma, existen potenciadores (potenciadores de la transcripción), elementos reguladores que activan la expresión de todos los genes virales y actúan principalmente en las células hepáticas. En particular, el gen S se expresa a un nivel muy alto solo en las células hepáticas y bajo la influencia de hormonas esteroides. Esta circunstancia explica por qué la hepatitis B crónica y el cáncer de hígado (hepatoma) se observan en los hombres con más frecuencia que en las mujeres que tienen un nivel más bajo de hormonas esteroides.

Otros elementos reguladores del virus de la hepatitis B modulan (controlan) los niveles de síntesis de proteínas individuales. Por ejemplo, una proteína grande se sintetiza solo en pequeñas cantidades. La mayor parte en la superficie de viriones infecciosos. Y la proteína principal y, en menor medida, la proteína media se sintetizan en grandes cantidades y dejan a las células en las partículas de antígeno de superficie, que en el suero contienen muchas veces más que los viriones maduros. El número de partículas de antígeno de superficie puede ser 1011 -1013 por 1 ml de sangre (varios cientos de μg).

El virus de la hepatitis B se aisló en una nueva familia de virus: Hepadnaviridae, género Orthohepadnavirus. Se encontraron hepadnavirus similares en varios animales (proteínas de la tierra, marmotas, ardillas listadas, patos de Pekín).

La reproducción de hepadnavirus tiene lugar de forma inusual. En particular, la replicación del ADN genómico se produce a través del enlace intermedio - ARN, es decir, con el mecanismo de transcripción inversa.

El ciclo de vida del virus de la hepatitis B.

• Adsorción en la célula.
• La penetración en la célula a través del mecanismo mediado por receptor de endocitosis (pit bordeada -> vial bordeada -> lisosoma -> salida de la nucleocápside y la entrada del genoma viral en el núcleo de hepatocitos).
• Reproducción intracelular.

Durante la penetración en la célula, la cadena de ADN corta ("más") se alarga (completa). En el núcleo, la ARN polimerasa dependiente de ADN celular sintetiza un ARN de 3.500 nucleótidos (pregenes) y ARNm más pequeños para la síntesis de proteínas virales. Luego, el pregen y la ADN polimerasa viral se empacan en una cápside recién sintetizada, que se transfiere al citoplasma. Aquí, se produce la transcripción inversa del pregenoma. Sintetiza un nuevo ADN "menos" definido. Después de que se completa la síntesis del ADN negativo, se destruye el ARN pregenómico. La ADN polimerasa del virión en la cadena "negativa" sintetiza una cadena "positiva". El ADN viral, ahora bicatenario, puede existir en la célula durante bastante tiempo y regresar al núcleo para el siguiente ciclo de replicación. Si la nueva partícula de virus no es sometido a más de replicación, la nucleocápside formado pasando a través de la membrana celular, cubierto superkapsidom, brote de la célula, y de inmediato se detiene la extensión corta de la "plus" -cadenas ADN. Es por eso que la longitud de este hilo varía. En una forma aguda típica de marcadores serológicos de hepatitis B siguientes secuencialmente aparecer en la sangre: HBsAg, HBeAg y anticuerpos (IgM, IgG): anti-HBcAg. Anti-HBeAg y anti-HBsAg.

La composición de virus de la hepatitis B tiene oncogén, pero encontró que, penetrando en el cromosoma celular (en sus diferentes secciones), el ADN viral se puede inducir en ellas diferente ajuste genética - supresión, la translocación, amplificación, que puede causar el desarrollo de cáncer de hígado - uno de las consecuencias más graves de la hepatitis viral B.

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Resistencia del virus de la hepatitis B

El virus de la hepatitis B es altamente resistente. A temperatura ambiente, permanece viable durante 3 meses, en estado congelado, durante varios años. El virus se inactiva completamente por tratamiento en autoclave (120 ° C) a reflujo durante 30 min, con calor seco a una temperatura de 180 "C durante 60 min, a 60 ° C -. Durante 10 horas resistentes en medio ácido, pero se destruye en un alcalino. El virus muere cuando se trata con H202, cloramina, formalina, fenol y con irradiación UV.

Patogénesis y síntomas de la hepatitis B

El virus se inyecta por vía hematógena directamente en el hígado. En la patogénesis de la hepatitis, las respuestas humorales y celulares autoinmunes juegan un papel importante. Se supone que la pérdida de hepatocitos debido no tanto a la acción directa del propio virus, pero con las reacciones inmunológicas del huésped que se producen en relación con la modificación de la membrana celular de las proteínas virales que inducen la aparición de autoanticuerpos contra las células del hígado. Por lo tanto, desarrollar hepatitis crónica y cirrosis hepática puede considerarse una enfermedad autoinmune.

Las reacciones autoinmunes celulares a proteínas virales contenidas en la membrana del hepatocito están mediadas por linfocitos T citotóxicos y otras células asesinas hepáticas. Por lo tanto, la distrofia aguda del hígado puede considerarse como una reacción de rechazo de un heteroinjerto peculiar.

El período de incubación dura de 45 a 180 días, un promedio de 60 a 90 días. El curso clínico de la hepatitis B se caracteriza por una gran diversidad; la enfermedad puede ocurrir: en forma latente, detectada solo por métodos de laboratorio, en una forma típica ictérica y en una forma maligna que termina en letal. La duración de la etapa anterior a ictericia varía de un día a varias semanas. El período ictérico, por regla general, es largo y se caracteriza por síntomas bien marcados (ictericia, hiperbilirrubinemia, oscurecimiento de la orina, esclerótica ictérica). Forma prolongada se observa en el 15-20% de los pacientes y el 90% de ellos desarrollan hepatitis crónica B. Los pacientes con forma crónica procesos autoinmunes observadas con frecuencia están acompañados por un alto contenido de anticuerpos protivopechenochnyh que son detectados por inmunoabsorción ligado a enzimas de ensayo (IPM). En los niños, la hepatitis B es leve y, a menudo, sin ictericia, en niños pequeños, en su mayoría asintomáticos.

La inmunidad postinfecciosa (humoral y celular) es prolongada, de por vida, debido a anticuerpos neutralizantes del virus (anti-HBsAg) en ausencia de antígeno de superficie en la sangre. A menudo se observa la inmunización latente debido al contacto repetido con el VHB, que es la causa de la inmunidad generalizada contra el virus en la población. Por lo general, los pacientes con una forma aguda de hepatitis B se recuperan completamente a medida que los anticuerpos se acumulan. Sin embargo, en algunos casos, a pesar del alto nivel de antígeno viral en la sangre (una circunstancia que explica por qué ocurre la infección parenteral con mayor frecuencia), no se producen anticuerpos contra ella. El virus permanece en el hígado y una persona durante mucho tiempo, a veces de por vida, se convierte en un portador crónico. Esta circunstancia está obviamente relacionada con una respuesta inmune débil. Uno de los resultados más comunes de la hepatitis B crónica es la cirrosis y el cáncer de hígado, que se desarrolla después de un período latente de hasta 30-50 años.

Epidemiología de la hepatitis B

La fuente de infección con el virus de la hepatitis B es solo una persona. Contrariamente a las representaciones anteriores que la infección con virus de la hepatitis B se produce exclusivamente por la ruta parenteral, ahora se ha demostrado que se encuentra en varias secreciones y excreciones :. Saliva, secreciones nasofaríngeas, heces, fluido lacrimal, semen, sangre menstrual, etc. Así, la infección se produce no sólo por la vía parenteral, sino también sexual y vertical (de la madre al feto), t. E. Virtualmente la infección con el virus de la hepatitis B puede, en muchos sentidos.

La hepatitis B en el mundo mató a tanta gente como durante todos los años de la Segunda Guerra Mundial. El número de portadores de VHB, según la OMS, es del 0.1 al 20% de la población de diferentes países o regiones.

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Diagnóstico de hepatitis B

Actualmente, el principal método para diagnosticar la hepatitis B es el uso de una reacción de hemaglutinación pasiva inversa (ROSGA) para detectar un virus o su antígeno de superficie, HBsAg. Como ya se señaló, la sangre del antígeno de superficie contiene muchas veces más que el virus en sí (100-1000 veces). Para la reacción de ROPGA, los eritrocitos se sensibilizan con anticuerpos contra el virus de la hepatitis B. Si hay un antígeno en la sangre, se produce una reacción de hemaglutinación. ROPGA es simple, conveniente, muy específico. Para detectar anticuerpos contra el antígeno del virus HBsAg, se usan diversos métodos inmunológicos (DSC, RPGA, IFM, RIM, etc.). Además, las variantes de PCR se usan para detectar el VHB y sus antígenos.

Se pueden usar diversos métodos inmunológicos para detectar anticuerpos contra el antígeno viral (HBsAg) en el suero del paciente (DSC, RPGA, reacción de precipitación, IFM, RIM, etc.).

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Prevención específica de la hepatitis B

Dada la alta incidencia de la hepatitis B, así como que en el mundo hay muchos portadores del VHB, de acuerdo con las recomendaciones de la OMS vacunados contra la hepatitis B son obligatorios y deben llevarse a cabo en el primer año de vida. Se sugieren dos tipos de vacunas para la vacunación. Para preparar uno de ellos, el plasma de los portadores del virus se utiliza como materia prima, ya que el antígeno del virus en él está contenido en cantidades suficientes para preparar la vacuna. La principal condición para la preparación de este tipo de vacuna es su completa seguridad, es decir, la inactivación completa del virus, que es proporcionada por la tecnología de preparación de la vacuna. Para la fabricación de otro tipo de vacuna utilizada métodos de ingeniería genética, en particular para la preparación de material antigénico, clon de levadura recombinante que produce el antígeno de superficie del virus de la hepatitis B

Ambas vacunas son altamente efectivas (protegen al 95% de los vacunados). La duración de la inmunidad posvacunal no es inferior a 5-6 años. Las vacunas se han creado tanto para adultos como para bebés y niños pequeños, el componente más importante en la lucha mundial contra la hepatitis B. El curso completo de la vacunación consiste en tres inyecciones:

Dosis - inmediatamente después del nacimiento; Dosis II: después de 1-2 meses; III dosis - hasta el final del primer año de vida.

Estas vacunas incluidas en el programa ampliado de inmunización, la OMS y alineado con el calendario de su aplicación (de acuerdo a las recomendaciones de la OMS sobre el primero año de vida se lleva a cabo la vacunación contra la tuberculosis, la poliomielitis, la hepatitis B, el sarampión, el tétanos, la difteria, la tos ferina).

La gammaglobulina, que contiene anticuerpos contra el VHB, se usa para la inmunoprofilaxis pasiva de emergencia en personas que han tenido contacto con un paciente con hepatitis B.

Para tratar la hepatitis B (formas aguda y crónica) use interferón y amixina (para la inducción de su síntesis endógena). En el tratamiento de la hepatitis B crónica, un nuevo medicamento lamivudina (nucleósido sintético) es eficaz.