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Microscopía intravital confocal de la córnea
Último revisado: 23.04.2024
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La microscopía confocal de la córnea es uno de los métodos modernos de investigación; permite realizar un control intravital del estado de la córnea con visualización de tejidos a nivel celular y microestructural.
Este método, debido al diseño original del microscopio y su alta resolución, permite visualizar los tejidos corneales vivos , medir el grosor de cada una de sus capas y evaluar el grado de alteraciones morfológicas.
El propósito de la microscopía confocal de la córnea
Caracterizar los cambios morfológicos en la córnea, derivados de diversas enfermedades inflamatorias y distróficas, así como de las intervenciones quirúrgicas y los efectos de la CR.
Los datos morfológicos son necesarios para evaluar la gravedad del proceso patológico, la efectividad del tratamiento y determinar las tácticas del manejo del paciente.
Indicaciones
- Enfermedades inflamatorias de la córnea ( queratitis ).
- Enfermedades distróficas de la córnea ( queratocono, distrofia de Fuchs, etc.).
- Síndrome de "ojo seco".
- Condiciones después de intervenciones quirúrgicas en la córnea (a través del trasplante de córnea, operaciones queratorefractivas).
- Condiciones asociadas con el uso de lentes de contacto.
[Técnica de microscopía confocal de la córnea
El estudio se realiza en un microscopio confocal ConfoScan 4 (Nider) con un aumento de 500 veces. El dispositivo le permite examinar la córnea en todo su espesor.
El tamaño de la zona investigada es de 440 × 330 μm, el grosor de la capa de exploración es de 5 μm. Una lente con una gota de gel se lleva a la córnea para que se toque y se establezca de modo que el grosor de la capa de líquido de inmersión sea de 2 mm. El diseño del dispositivo le permite examinar la córnea en la zona central y sus áreas paracentrales.
Normal desempeño
Imagen morfológica normal de la córnea
El epitelio anterior consiste de 5-6 capas de células. El espesor promedio de todo el epitelio es de aproximadamente 50 μm. De acuerdo con la estructura morfológica, se distinguen las siguientes capas (de adentro hacia afuera): basal, subular y superficial.
- La capa más interna (basal) está representada por pequeñas células cilíndricas densas sin núcleo visible. Los bordes de las células basales son claros, brillantes.
- La capa intermedia consiste en 2-3 capas de células con forma de espina dorsal (con alas) con invaginaciones profundas, en las cuales se construyen las excrecencias de las células vecinas. Microscópicamente, los límites de las células son bastante bien distinguibles, y los núcleos pueden no estar definidos o ser borrosos.
- La capa superficial del epitelio está representada por una o dos capas de células poligonales con límites claros y una densidad homogénea. Los núcleos son generalmente más brillantes que el citoplasma, en el que también se puede distinguir un anillo oscuro próximo al núcleo.
Entre las células de la capa superficial se distingue entre oscuro y claro. El aumento de la reflectividad de las células epiteliales indica una disminución en el nivel de metabolismo en ellas y el comienzo de su descamación.
La membrana de Bowman es una estructura transparente que no refleja la luz, por lo que es imposible visualizarla cuando se realiza una microscopía confocal.
El plexo subbásico del nervio se encuentra debajo de la membrana de Bowman. Normalmente, las fibras nerviosas se ven como tiras brillantes que corren en paralelo sobre un fondo oscuro, contactando entre sí. La reflectividad (reflectividad) puede ser desigual en la longitud de la fibra.
El estroma de la córnea ocupa del 80 al 90% del grosor de la córnea y consta de un componente celular y extracelular. Los elementos celulares básicos del estroma son los queratocitos; constituyen aproximadamente el 5% del volumen.
Un patrón microscópico típico del estroma incluye varios cuerpos brillantes ovales irregulares (núcleos de queratocitos) que se encuentran en el grosor de una matriz transparente de color gris oscuro o negro. Normalmente, la visualización de estructuras extracelulares es imposible debido a su transparencia. El estroma se puede dividir condicionalmente en subcapas: anterior (ubicado directamente debajo de la membrana de Bowman y constituye el 10% del grosor del estroma), anterior, medio y posterior.
La densidad promedio de queratocitos es mayor en el estroma anterior, y su número disminuye gradualmente hacia las capas posteriores. La densidad de las células del estroma anterior es casi el doble que la del estroma posterior (si la densidad de las células del estroma anterior se toma como 100%, entonces la densidad de las células del estroma posterior es de aproximadamente 53.7%). En el estroma anterior, los núcleos de queratocitos tienen una forma redonda en forma de frijol, y en el óvalo posterior y más alargados.
Los núcleos de queratocitos pueden diferir en brillo. La diferente capacidad de reflejar la luz depende de su estado metabólico. Las células más brillantes se consideran queratocitos activados ("células de estrés"), cuyas actividades están destinadas a mantener la homeostasis corneal interna. En la norma y el campo de visión, hay celdas únicas activadas.
Las fibras nerviosas en el estroma anterior de la córnea se visualizan como bandas homogéneas brillantes, a menudo formando bifurcaciones.
La membrana de descemet es normalmente transparente y no se visualiza mediante microscopía confocal.
El epitelio posterior es una monocapa de células planas hexagonales o poligonales con una superficie uniformemente clara contra un fondo de distintos límites intercelulares oscuros.
El dispositivo proporciona la posibilidad de un cálculo manual o automático de la densidad celular, su área y el coeficiente de variabilidad.
Cambios patológicos en la estructura de la córnea
El queratocono se caracteriza por cambios significativos en el epitelio anterior y el estroma de la córnea.