Vitamina A en la sangre

Los valores de referencia (norma) de la concentración de vitamina A (retinol) en el suero sanguíneo: en niños de 1-6 años - 0.7-1.5 μmol / l, 7-12 años - 0.91-1.71 μmol / l, 13 -19 años - 0,91-2,51 μmol / l; en adultos es de 1.05-2.09 μmol / l.

La vitamina A se refiere a liposolubles e existe en dos formas - la vitamina A o retinol (que sólo se encuentra en los productos animales) y pro-vitamina A, conocida como caroteno real (preparados a partir de origen animal o vegetal), que se puede convertir en retinol en las paredes el tracto digestivo. Aproximadamente el 50-90% de retinol comida entrante se absorbe en el intestino delgado y se transporta en quilomicrones asociados con el complejo al hígado, donde se almacena en forma de palmitato de retinol. Si se desea, se libera en el torrente sanguíneo en forma de retinol, está en combinación con la vitamina una proteína de unión. En el suero, el complejo de vitamina A + proteína retinol se une a la transtiretina. De retinol sérico es capturado por las células diana, tales como los fotorreceptores y en el epitelio retinal.

Cuando la vitamina A ingresa al cuerpo en exceso de los requerimientos (180-430 μg de retinol por día según la edad, el sexo y la condición fisiológica), su exceso se deposita en el hígado formando el depósito de esta vitamina. Con una ingesta reducida de retinol de los alimentos, sus reservas de hígado se liberan en el torrente sanguíneo, manteniendo la concentración de retinol en el suero a un nivel normal (por encima de 0,7 μmol / L). Otras formas biológicamente activas de vitamina A (ácido retiniano y ácido retinoico) están presentes en la sangre en concentraciones muy bajas (por debajo de 0,35 μmol / l); en los ésteres de retinol representa aproximadamente el 5% de la vitamina A total (0.1-0.1 μmol / l).

La vitamina A tiene un papel importante en los procesos de oxidación-reducción. El retinol promueve la formación de glucógeno en el hígado y los músculos, promueve el aumento de colesterol en la sangre, participa en la síntesis de hormonas esteroides y sexuales. Se requiere para el crecimiento y la formación de hueso resíntesis esqueleto de la rodopsina, y también contribuye al funcionamiento normal de las membranas mucosas y epitelio de la cubierta de la piel, evitando su metaplasia, hiperqueratosis y descamación excesiva. La vitamina A ayuda a fortalecer el cabello, los dientes y las encías. En los últimos años, muestra variada papel de la vitamina A en la prevención del cáncer y la regulación de la inmunidad (esencial para la finalización de la fagocitosis, aumentar la síntesis de Ig, estimula la producción de células T asesinas, estimula el tipo T-helper II et al.). Vitamina A: un antioxidante activo que actúa principalmente en presencia de vitamina E; protege la vitamina C de la oxidación. La deficiencia de vitamina A se considera un factor de riesgo para las neoplasias malignas. En estudios experimentales, se demostró que un aumento en el contenido de vitamina A en la dieta aumenta la duración media de la vida en un 17,5%. El zinc es un cofactor esencial del metabolismo de la vitamina A (necesario para la síntesis de la proteína de unión a la vitamina A).

El requerimiento diario promedio para los adultos de retinol (20-50 años) era de 1,2 mg (4,000 IU, 1 IU es equivalente a 0,3 microgramos de retinol) para mujeres embarazadas - 1.5 mg (5.000 UI) para la lactancia materna - 1, 8 mg (6000 UI), para personas mayores de 60 años - 2.5 mg (10,000 UI). Al menos un tercio del requerimiento diario de retinol debe ser entregado al cuerpo en forma preparada; el resto puede ser absorbido por el uso de carotenoides, de los cuales el retinol se forma en el cuerpo. Debe tenerse en cuenta que aproximadamente el 30% del retinol en los alimentos se destruye por su tratamiento térmico. La actividad del retinol es 2 veces mayor que el caroteno, además, este último solo absorbe del 30 al 40% en el intestino. Por lo tanto, al evaluar la ingesta dietética, se considera que 1 mg de retinol corresponde aproximadamente a 6 mg de carotenoides.

Determinación de retinol (vitamina A) y carotenoides en suero según Bessey en la modificación de LA Anisimova

Principio del método

La determinación de vitamina A y carotenoides se basa en su hidrólisis en una solución de alcohol alcalino, seguida de la extracción con una mezcla de disolventes orgánicos.

Reactivos

• 11 M de solución de hidróxido de potasio (KOH).
• 96% de alcohol etílico.
• Solución 1 M de hidróxido de potasio (KOH) en alcohol etílico al 96%: 1 volumen de solución de KOH 11 M se mezcla con 10 volúmenes de alcohol etílico al 96%. El reactivo se prepara el día del estudio. Si se produce una mancha durante la mezcla, el alcohol debe limpiarse por destilación antes de su uso.
• Xylol, hp.
• Oktan, h.ch.
• Mezcla de xileno-octano: preparada mezclando volúmenes iguales de xileno y octano.

Las investigaciones se llevan a cabo en un espectrofotómetro.

El curso de la determinación de la vitamina A

La sangre tomada del dedo (aproximadamente 1 ml) se introduce en la etiqueta de la centrífuga y se coloca en un vaso de vidrio con agua tibia (temperatura 40-45 ° C) durante 20-30 minutos. Para separar el suero, un coágulo de sangre se enrolla cuidadosamente alrededor del borde del tubo con una varilla de vidrio delgada y se centrifuga a 3000 rpm durante 10 minutos.

Seleccione 0.12 ml de suero y transfiéralo a un tubo de aglutinación, luego agregue 0.12 ml de una solución de hidróxido de potasio 1M de alcohol. Los contenidos se agitan completamente.

Los tubos de ensayo con sondas se colocan en un baño de agua durante 20 minutos a una temperatura de 60 ° C para la hidrólisis.

Las muestras se enfrían y se les añaden 0,12 ml de una mezcla de xileno-octano, se agitan vigorosamente durante 10-15 segundos. Enfriar de nuevo y centrifugar.

Retire con cuidado la capa superior que contiene vitamina A y carotenoides con una pipeta Pasteur con una lata de goma y transfiérala a microcubetas.

Las muestras son espectrofotométricas a una longitud de onda de 328 nm, para determinar la vitamina A, y a una longitud de onda de 460 nm, para determinar carotenoides.

Después de espectrofotometría de la muestra estudiada se somete a la radiación ultravioleta para la destrucción de la vitamina A. Para este propósito, a una distancia de 15-20 cm desde el microcubetas de cuarzo establecer lámpara (bactericida) de modo que la irradiación porción de la cubeta expuesto, lleno de líquido; el tiempo de exposición de 45-60 minutos.

Las muestras son espectrofotométricas repetidas a una longitud de onda de 328 nm. El contenido de vitamina A se determina a partir de la diferencia en los valores de extinción (densidad óptica), teniendo en cuenta el coeficiente (factor) 637, calculado por Bessey para la vitamina A.

El cálculo se lleva a cabo de acuerdo con la fórmula:

X = 637 × (Е328 (1) - Е328 (2)),

Donde X es el contenido de vitamina A, μg / dL; 637 es el coeficiente calculado por Bessey para la determinación de la vitamina A; Е328 (1) - la densidad óptica de la solución antes de la irradiación; E328 (2) es la densidad óptica de la solución después de la irradiación.

El coeficiente para transferir la concentración de vitamina A desde μg / dL en μmol / l es 0.035.

El contenido de carotenoides se calcula mediante la fórmula:

X = 480-Е480,

Donde X es el contenido de carotenoides, μg / dL; 480 es el coeficiente calculado por Bessey para determinar carotenoides; E480 es la densidad óptica de la solución de prueba.

Nota:

Según Bessey, en la investigación puede tomar un volumen mayor o menor de suero, pero su relación con el volumen de solución de alcohol debe ser constante para cualquier cambio en el volumen (cantidad) mezcla octanoico-xileno.

La norma en el contenido de vitamina A en el suero sanguíneo es la siguiente: en recién nacidos y lactantes: 160-270 μg / l; en adultos, 1.05-2.45 μmol / l (300-700 μg / l). El contenido de carotenoides en el suero adulto es 800-2300 μg / l.