Microscopía confocal

Actualmente, se considera que la microscopía confocal es uno de los métodos más prometedores de imagenología de la piel in vivo, y por lo tanto, el interés en él tanto entre los médicos como entre los representantes de institutos de investigación científica es inusualmente alto.

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Capacidades de microscopía confocal

En dermatología, la microscopía láser confocal se utiliza para:

• estudiar la penetración de compuestos en la piel (vías de penetración, cinética, distribución en la piel);
• observación de las glándulas (definición de estado activo y pasivo);
• estudios de la cama microcirculatoria (incluso en tiempo real);
• diagnóstico de neoplasmas.

Sin discutir los méritos y deméritos de las variedades anteriores de microscopía confocal, observamos que en los últimos años, la microscopía confocal con láser de fluorescencia ha ganado popularidad.

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Microscopía confocal para el examen de la piel

El microscopio confocal proporciona dos oportunidades invaluables: el estudio de los tejidos a nivel celular en el estado de la vida fisiológica y la demostración de los resultados del estudio (es decir, actividad celular) en cuatro dimensiones: altura, ancho, profundidad y tiempo. Para la calidad de la imagen y la profundidad del estudio, el papel más importante lo desempeña la capacidad del tejido para transmitir luz, en otras palabras, su transparencia. El método de microscopía confocal es sin contacto, el rayo de luz no causa ningún daño o incomodidad al paciente o al animal de experimentación.

Para estudiar la piel, se usa microscopía láser de barrido confocal (CSLM). El método le permite ver la epidermis y la capa de dermis papilar con una resolución cercana a la histológica. Todos los resultados de la encuesta se muestran en el monitor y se guardan como un paquete de archivos de imagen (en forma de microfilm (en dinámica) o microfotografías).

Hay dos tipos de método:

• Reflectivo (CSLM de reflectancia): se basa en el hecho de que diversas estructuras intracelulares e intercelulares tienen un índice de refracción de la luz diferente, lo que permite obtener una imagen de contraste.
• fluorescencia (fluorescencia CSLM): utiliza luz láser que penetra en la piel y excita en ella exo o endocromóforos, que en respuesta comienzan a emitir fotones (es decir, fluorescencia).

La resolución lateral es la distancia mínima entre los puntos ubicados en el plano horizontal, es decir un plano paralelo a la superficie de la piel. La resolución axial es la distancia mínima entre los puntos ubicados en un plano perpendicular a la superficie de la piel.

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La historia de la microscopía confocal

La idea de crear un microscopio capaz a nivel celular de mostrar un corte intravital de tejido vivo se desarrolló activamente hace 130 años. El elemento principal de los microscopios modernos se diseñó a finales del siglo XIX y era un disco giratorio con los orificios más pequeños ubicados en espiral. Este disco fue inventado en 1883 por un estudiante alemán Paul Nipkov, en honor al cual recibió su nombre: el disco Nipkov (o disco nipkov). La invención se basó en la capacidad de la luz, que pasa a través de los orificios más pequeños en el disco y la lente de aumento, para penetrar en la profundidad del tejido e iluminar el fragmento de la célula a una distancia de la superficie. Cuando el disco gira rápidamente, los fragmentos se agregan a la imagen general. Al eliminar o aproximar la estructura al objeto, se puede variar la profundidad de la sección óptica del tejido que se está examinando.

Solo con el advenimiento de las videograbadoras en la década de 1980 y las computadoras capaces de procesar imágenes, a principios de la década de 1990 hubo una oportunidad real para crear y aplicar efectivamente los microscopios modernos que se utilizan en nuestro tiempo.