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Hibridación in situ
Último revisado: 23.04.2024
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El procedimiento de hibridación puede llevarse a cabo no solo en el gel, en filtros o en solución, sino también en preparaciones histológicas o cromosómicas. Este método se llama hibridación in situ. Una variante del método en el que las preparaciones de ADN o ARN marcadas con fluorocromos se usan como sondas se denomina FISH (hibridación fluorescente in situ). La sonda de ADN marcada se aplica a preparaciones de cromosomas de metafase de hibridación (desnaturalizados) de colores diferenciales y preparados. El pretratamiento de los cromosomas se usa para facilitar el acceso de la sonda al ADN genómico. Después de lavar las moléculas de ADN no unidas y la aplicación de una emulsión fotosensible (usando un marcador radiactivo) o del tratamiento correspondiente (usando biotina o marcados con fluoresceína sondas de ADN) localización de secuencias de ADN complementarias a la sonda de ADN utilizada, puede identificarse a sí mismo cuando microscopía la forma de puntos característicos sobre las partes correspondientes de ciertos cromosomas.
Este método de investigación permite determinar no solo el accesorio cromosómico, sino también la localización intracromosómica del gen bajo investigación.
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