Análisis microscópico de esputo

La observación microscópica de las muestras de esputo teñidas nativas y fija permite un examen detallado de su estructura celular, y en cierta medida refleja la naturaleza del proceso patológico en los pulmones y los bronquios, su actividad, para identificar las diferentes formación fibrosa y cristalina, también tienen un valor de diagnóstico importante, y, finalmente, evaluar aproximadamente la condición flora microbiana del tracto respiratorio (bacterioscopia).

En un microscopio use preparaciones nativas y pintadas de un esputo. Para estudiar la flora microbiana (bacterioscopia), los frotis de esputo usualmente son teñidos por Romanovsky-Giemsa, según Gram, y para la detección de Mycobacterium tuberculosis, pero Cilu-Nielsen.

Elementos celulares y fibras elásticas

De los elementos celulares que pueden detectarse en el esputo de pacientes con neumonía, las células epiteliales, los macrófagos alveolares, los leucocitos y los eritrocitos son de importancia diagnóstica.

Células epiteliales. El epitelio escamoso no tiene de la boca,, los pliegues vocales nasofaringe y el valor diagnóstico epiglotis, a pesar de que la detección de un gran número de células escamosas, típicamente indica una muestra bajo esputo calidad entregada al laboratorio y saliva que contenía impureza sustancial.

En pacientes con neumonía, el esputo se considera adecuado para la investigación si, con un microscopio con un pequeño aumento, el número de células epiteliales no supera 10 en el campo de visión. Un mayor número de células epiteliales indica un predominio inaceptable de contenido orofaríngeo en la muestra biológica.

Los macrófagos alveolares, que en pequeñas cantidades también se pueden encontrar en cualquier esputo, son células grandes de origen reticulohistocítico con un núcleo grande ubicado excéntricamente y abundantes inclusiones en el citoplasma. Estas inclusiones pueden consistir en pequeñas partículas de polvo absorbidas por macrófagos (células de polvo), leucocitos y similares. El número de macrófagos alveolares aumenta con los procesos inflamatorios en el parénquima pulmonar y las vías respiratorias, incluida la neumonía.

Células del epitelio cilíndrico ciliado que recubren la membrana mucosa de la laringe, la tráquea y los bronquios. Parecen células alargadas, ensanchadas en un extremo, donde se encuentran el núcleo y los cilios. Las células epitelio ciliado cilíndrica encontrar en cualquier esputo, pero su aumento indica daños mucosa bronquial y la tráquea (aguda y bronquitis crónica, bronquiectasia, traqueítis, laringitis).

Los leucocitos en pequeñas cantidades (2-5 en el campo de visión) se encuentran en cualquier esputo. Cuando la inflamación del tejido pulmonar o la mucosa bronquial y la tráquea, especialmente cuando la supuración (gangrena, absceso pulmonar, bronquiectasias), su número aumenta significativamente.

Al teñir las preparaciones de esputo según Romanovsky-Giemsa, es posible diferenciar los leucocitos individuales, lo que a veces tiene un importante valor diagnóstico. Por lo tanto, con la inflamación pronunciada del tejido pulmonar o la mucosa bronquial, aumentan tanto el número total de leucocitos neutrofílicos como el número de sus formas degenerativas con fragmentación de los núcleos y destrucción del citoplasma.

Un aumento en el número de formas degenerativas de leucocitos es el signo más importante de la actividad del proceso inflamatorio y el curso más severo de la enfermedad.

Eritrocitos. Los eritrocitos simples se pueden detectar prácticamente y cualquier esputo. Se observa un aumento significativo cuando se altera la permeabilidad vascular en pacientes con neumonía, con destrucción de tejido pulmonar o bronquial, estancamiento en un pequeño círculo de circulación, infarto pulmonar, etc. En una gran cantidad de glóbulos rojos en el esputo se encuentran durante la hemoptisis de cualquier génesis.

Las fibras elásticas. Un elemento más de las fibras plásticas de esputo que aparecen en el esputo cuando también se debe mencionar la destrucción del tejido pulmonar (absceso pulmonar, tuberculosis, cáncer de pulmón en desintegración, etc.). Las fibras elásticas se presentan en esputo en forma de filamentos rizados, finos, de dos con dos divisiones dicotómicas en los extremos. La aparición de fibras elásticas en el esputo en pacientes con neumonía grave indica la aparición de una de las complicaciones de la enfermedad: absceso del tejido pulmonar. En algunos casos, en la formación del absceso pulmonar, las fibras elásticas en el esputo se pueden detectar incluso ligeramente antes que los cambios radiográficos correspondientes.

A menudo, con neumonía crupulosa, tuberculosis, actinomicosis, bronquitis fibrinosa en preparaciones de esputo, se pueden detectar fibras delgadas de fibrina.

Los signos de un proceso inflamatorio activo en los pulmones son:

1. la naturaleza del esputo (mucopurulento o purulento);
2. un aumento en el número de neutrófilos en el esputo, incluidas sus formas degenerativas;
3. un aumento en el número de macrófagos alveolares (a partir de cúmulos individuales de varias células en el campo de visión y más);

La aparición en el esputo de fibras elásticas indica la destrucción del tejido pulmonar y la formación de un absceso pulmonar.

Las conclusiones finales sobre la presencia y el grado de actividad de la inflamación y destrucción del tejido pulmonar se forman solo cuando se comparan con el cuadro clínico de la enfermedad y los resultados de otros métodos de investigación de laboratorio e instrumentales.

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Flora microbiana

La microscopía de frotis, teñida según Gram, y el estudio de la flora microbiana (bacterioscopia) en una parte de pacientes con neumonía permite establecer tentativamente el agente causal más probable de infección pulmonar. Este método simple de diagnóstico rápido del patógeno no es lo suficientemente preciso y debe usarse solo en combinación con otros métodos (microbiológicos, inmunológicos) de examen del esputo. La microscopía de inmersión de frotis teñidos a veces es muy útil para la selección de emergencia y la administración de una terapia antibiótica adecuada. Sin embargo, se debe tener en cuenta la posibilidad de contaminación de los contenidos bronquiales de la microflora del tracto respiratorio superior y la cavidad oral, especialmente cuando la recolección de esputo es incorrecta.

Por lo tanto, el esputo se considera adecuado para una investigación adicional (bacterioscopía y examen microbiológico) solo si cumple con las siguientes condiciones:

• La tinción de Gram en el esputo revela una gran cantidad de neutrófilos (más de 25 en el campo de visión con una pequeña ampliación del microscopio);
• El número de células epiteliales, más características de los contenidos de la orofaringe, no supera 10;
• en la preparación hay un predominio de microorganismos del mismo tipo morfológico.

En la tinción de Gram del esputo en un frotis veces sea suficiente para identificar gramo neumococos, estreptococos, estafilococos y el grupo de bacterias gram-negativas bueno -. Klebsiellu, varita Pfeiffer, E. Coli y otras bacterias gram-positivas En este caso convertido en azul, y Gram - rojo.

Patógenos bacterianos de la neumonía

Gram-positivo	Gram-negativo
Pneumococcus Streptococcus pneumoniae. Streptococci Streptococcus pyogenes, Streptococcus viridans. Estafilococos: Staphylococcus aureus, Staphylococcus haemolyticus.	Klebsiella  (Klebsiella pneumoniae) Hemophilus influenzae (Pfeiffer) Haemophilius influenzae Pseudomonas aeruginosa  (Pseudomonas aeruginosa) Legionella (Legionella Pneumophilia) E. Coli (Escherichia coli)

Pre frotis de esputo es la forma más fácil de verificación patógeno neumonía y tiene un valor definido para la selección de la terapia antibiótica óptima. Por ejemplo, cuando la detección de frotis teñidos por Gram, diplococos grompolozhitelnyh (neumococos) o estafilococos en lugar de antibióticos de amplio espectro, que aumentan el riesgo de selección y propagación de microorganismos aitibiotikorezistentnyh posible asignar la terapia dirigida, activo frente a estafilococos, o neumococos. En otros casos, la detección de la flora dominante en los frotis de Gram puede indicar pas que causa neumonía Enterobacteriaceae son gram-negativos (Klebsiella, E. Coli, etc.), lo que requiere una terapia dirigida correspondiente destino.

Sin embargo, la conclusión provisional del agente causal probable de infección pulmonar por microscopía puede hacerse pas solamente basados aumento significativo de bacterias en el esputo, en una concentración de 10 ⁶ - 10 ⁷  células microbianas / ml o más (LL Vishnjakova). Las bajas concentraciones de microorganismos (<10 ³  m.ks / ml) son características de la microflora acompañante. Si la concentración de células microbianas varía de 10 ⁴  a 10 ⁶  microbianas células / ml, no excluye el papel etiológico de este microorganismo en la ocurrencia de infección pulmonar, pero no lo prueba.

También se debe recordar que los patógenos intracelulares "atípicos" (micoplasma,  legionela, clamidia, rickettsia) no tiñen Gramm. En estos casos, la sospecha de tener una infección "atípica" puede ocurrir si los frotis muestran una disociación entre una gran cantidad de neutrófilos y un número extremadamente pequeño de células microbianas.

Desafortunadamente, el método de la bacterioscopia generalmente es bastante bajo en sensibilidad y especificidad. El valor no predictivo, incluso para los neumococos bien visualizados, apenas alcanza el 50%. Esto significa que en la mitad de los casos, el método arroja resultados falsos positivos. Esto se debe a varias razones, una de ellas es el hecho de que alrededor de un tercio de los pacientes antes de la hospitalización han recibido antibióticos, lo que reduce en gran medida la eficacia de la citología de esputo. Además, incluso en el caso de resultados positivos del estudio, lo que indica una concentración suficientemente alta en el frotis patógenos bacterianos "típico" (por ejemplo neumocócica), no puede excluir por completo la presencia de co-infección "atípicos" patógenos intracelulares (micoplasma, Chlamydia, Legionella).

El método de bacterioscopía de frotis de esputo, teñido por Gram, en algunos casos ayuda a verificar el agente causal de la neumonía, aunque generalmente tiene un valor predictivo muy bajo. Los patógenos intracelulares atípicos (micoplasma, legionela, clamidia, rickettsia) no se verifican en absoluto por el método de la bacterioscopia, ya que no tiñen Gramm.

Cabe mencionar la posibilidad de un diagnóstico microscópico en pacientes con neumonía por infección fúngica pulmonar. El más relevante para los pacientes que reciben tratamiento a largo plazo con antibióticos de amplio espectro es la detección de esputo de Candida albicans en forma de células similares a levadura y micelio ramificado mediante microscopía de preparaciones de esputo nativas o teñidas. Indican un cambio en la microflora del contenido traqueobronquial, que se produce bajo la influencia del tratamiento con antibióticos, que requiere una corrección sustancial de la terapia.

En algunos casos, en pacientes con neumonía, existe la necesidad de diferenciar la enfermedad pulmonar existente de la tuberculosis. Para este propósito, se utiliza el color del frotis de esputo según Tsiol-Nielsen, que en algunos casos permite identificar la tuberculosis micobacteriana, aunque el resultado negativo de tal estudio no significa que el paciente no tenga tuberculosis. Cuando se mancha el esputo de acuerdo con Tsil-Nielsen, mycobacterium tuberculosis se tiñe de rojo y todos los demás elementos de esputo son azules. Las micobacterias tuberculosas tienen la apariencia de heces, palos rectos o ligeramente curvados de diferentes longitudes con engrosamientos separados. Están ubicados en la preparación en grupos o individualmente. El valor diagnóstico es la detección en la preparación de incluso una sola micobacteria tuberculosis.

Para aumentar la efectividad de la detección microscópica de micobacterias tuberculosis, use una cantidad de métodos adicionales. El más común de ellos es el llamado método de flotación, en el que el esputo homogeneizado se agita con tolueno, xileno o gasolina, cuyas gotas aparecen y capturan micobacterias. Después de establecer el esputo, la capa superior se pipetea en la diapositiva. Entonces, Tsilyu-Nielsen fija y tiñe la droga. Existen otros métodos de acumulación (electroforesis) y microscopía de bacterias de la tuberculosis (microscopía de luminiscencia).

El examen microscópico (análisis) del moco permite detectar moco, elementos celulares, formaciones fibrosas y cristalinas, hongos, bacterias y parásitos.

Células

• Los macrófagos alveolares son células de origen reticulogistocyte. Se detecta una gran cantidad de macrófagos en el esputo en procesos crónicos y en la etapa de resolución de procesos agudos en el sistema broncopulmonar. Los macrófagos alveolares que contienen hemosiderina ("células de defectos cardíacos") se detectan con un infarto leve, hemorragia, estancamiento en un pequeño círculo de circulación sanguínea. Los macrófagos con gotas de lípidos son un signo de proceso obstructivo en los bronquios y los bronquiolos.
• Las células de Xantom (macrófagos grasos) se encuentran en abscesos, actinomicosis, echinococcosis de los pulmones.
• Las células del epitelio cilíndrico ciliado son células de la membrana mucosa de la laringe, la tráquea y los bronquios; se encuentran en bronquitis, traqueitis, asma bronquial, neoplasmas malignos de los pulmones.
• El epitelio plano se detecta cuando la saliva ingresa al esputo, no tiene importancia diagnóstica.
• Los leucocitos en una u otra cantidad están presentes en cualquier esputo. Se detecta una gran cantidad de neutrófilos en esputo mucopurulento y purulento. Los eosinófilos son ricos en esputo en asma bronquial, neumonía eosinofílica, lesiones pulmonares de glotis e infarto pulmonar. Los eosinófilos pueden aparecer en el esputo para la tuberculosis y el cáncer de pulmón. Los linfocitos en grandes cantidades se encuentran en la tos ferina y, más raramente, en la tuberculosis.
• Eritrocitos. La detección de glóbulos rojos únicos en el esputo no tiene importancia diagnóstica. Si hay sangre fresca en el esputo, se determinan los eritrocitos sin cambios, pero si la sangre que ha estado en el tracto respiratorio durante mucho tiempo sale con esputo, se encuentran glóbulos rojos lixiviados.
• Las células de tumores malignos se encuentran en neoplasmas malignos.

Fibras

• Las fibras elásticas aparecen en la descomposición del tejido pulmonar, que se acompaña de la destrucción de la capa epitelial y la liberación de fibras elásticas; se encuentran en tuberculosis, abscesos, equinococosis, neoplasmas en los pulmones.
• Las fibras coronales se detectan en las enfermedades pulmonares crónicas, como la tuberculosis cavernosa.
• Las fibras elásticas calcinadas son fibras elásticas impregnadas con sales de calcio. La detección de ellos en el esputo es característica de la descomposición de la petrichitis tuberculosa.

Espirales, cristales

• Las espirales de Kurshman se forman en el estado espástico de los bronquios y la presencia de moco en ellos. Durante un impulso de tos, se libera mucosidad viscosa en la luz de un bronquio más grande, retorciéndose en espiral. Las espirales de Kurshman aparecen con asma bronquial, bronquitis, tumores de pulmón, compresión de bronquios.
• Los cristales de Charcot-Leiden son producto de la descomposición de los eosinófilos. Usualmente aparecen en un esputo que contiene eosinófilos; son característicos para el asma bronquial, afecciones alérgicas, infiltrados eosinofílicos en los pulmones, duelas pulmonares.
• Los cristales de colesterol aparecen con abscesos, equinococosis pulmonar, neoplasmas en los pulmones.
• Los cristales de hematoidina son característicos para el absceso y la gangrena del pulmón.
• Drusos de actinomicetos se detectan en la actinomicosis de los pulmones.
• Los elementos del equinococo aparecen con la equinococosis de los pulmones.
• Corks Dietrich - grumos de un color gris amarillento, que tiene un olor desagradable. Consisten en detritus, bacterias, ácidos grasos, gotitas de grasa. Son típicos de un absceso de pulmón y bronquiectasia.
• La tétrada de Ehrlich consta de cuatro elementos: detritus calcificado, fibras elásticas calcificadas, cristales de colesterol y mycobacterium tuberculosis. Aparece en la descomposición del foco tubercular primario calcificado.

El micelio y las células fúngicas en ciernes aparecen en las lesiones fúngicas del sistema broncopulmonar.

Pneumocystis ocurre con pneumonia pneumocystis.

Las esférulas de hongos se detectan en la coccidioidomicosis de los pulmones.

Las larvas de ascarido se detectan con ascariasis.

Las larvas del intestino ugristic se identifican con strongyloidiasis.

Los huevos del trematodo pulmonar se identifican con paragonimosis.

Elementos encontrados en el esputo en el asma bronquial. Cuando el asma bronquial generalmente se separa por una pequeña cantidad de esputo viscoso y mucoso. Macroscópicamente se puede ver la espiral de Kurshman. Cuando la investigación microscópica es característica de la presencia de eosinófilos, epitelio cilíndrico, hay cristales de Charcot-Leiden.